Erytrocytemorfologi, fasekontrastmikroskopi

Fasekontrastmikroskopi er en diagnostisk prosedyre brukt i urologi og nefrologi (nyrestudie) for undersøkelse og evaluering av cytomorfologiske vitale prøver (prøve med levende celler) i hematuri og urinsedimentdiagnostikk. Den enestående betydningen av denne metoden er spesielt basert på muligheten, relevant for diagnostikk, av å vurdere erytrocyttmorfologien (form av den røde blod celler), som kan gi verdifull informasjon om opprinnelsen til en mulig hematuri (blod i urinen) eller erytrocyturi (røde blodlegemer i urinen). Fasekontrastmikroskopi av urinsediment er ideell for evaluering av ulike former for erytrocytter.Introduksjonen av fasekontrastmikroskopi i rutinediagnostikk kan sees på som et stort fremskritt, da det gjør det lettere å skille patognomoniske urinkomponenter fra ikke-patologiske gjenstander. Fasekontrastmikroskopi er bedre enn lysfeltmikroskopi, som ble brukt til introduksjonen av fasekontrastmikroskopi, med hensyn til differensiering av gjenstander. Hvis et uklart eller usikkert funn er til stede, kan ty til denne prosedyren spare mindre nyttige tiltak som radiologisk eller cystoskopisk diagnose (cystoskopi) for glomerulær hematuri (se nedenfor), og dermed redusere kostnadene og spare behandlingstid.

Indikasjoner (bruksområder)

Fasekontrastmikroskopi brukes i urologi og nefrologi for å studere erytrocytmorfologi:

• Vurdering av cytomorfologiske vitale prøver ved hematuri og urinsedimentdiagnose. Indikasjon:> 6-8 erytrocytter/ l påvisbar i urin eller positiv stripetest. I sammenheng med erytrocytmorfologi utføres differensiering av glomerulær hematuri fra ikke-renal erytrocyturi ved påvisning av dysmorf (glomerulær) og eumorf erytrocytter.
• Dysmorf hematuri av glomerulær opprinnelse finnes hos pasienter med membranøs og membranoproliferativ glomerulonefritt, samt IgA nefropati, fokal og segmental nefrosklerose og lupus nefritt. I glomerulær hematuri blir erytrocytter tvunget gjennom skadede kjellermembraner i glomerulære kapillærer og forårsaker skade. Mikroskopisk kjenner man igjen dysmorfe erytrocytter, som også kalles akantocytter (= erytrocytter med “Mikke Mus-ører”).
• Eumorf hematuria (postglomerular hematuria) er funnet hos pasienter med nyrecyster i brudd i det hule systemet, blære bilharzia, blod blanding fra skjeden (skjeden), skade etter plassering av en blærekateter, blod koagulasjonsforstyrrelser, etc.

Fremgangsmåten

Prinsippet med fasekontrastmikroskopi er basert på interferens av lysstråler i strålebanen til mikroskopet, som kan oppnå et høykontrastbilde av ufargede celler. Struktur og funksjon av fasekontrastmikroskop:

• Den ringformede åpningen, kondensatoren, den ringformede faseplaten og objektivet er av spesiell betydning for funksjonen til fasekontrastmikroskopet. Ved å sette den ringformede blenderåpningen inn i kondensatoren og faseplaten i målet, blir en separasjon av ikke-diffrakterte og diffrakterte lysstråler forårsaket. Den resulterende forsinkelsen i bølgelengden til de diffrakterte lysstrålene fremkaller en faseforskjell som optisk gjør at de strukturelle detaljene til det mikroskopiske objektet som undersøkes virker mørkere enn det omkringliggende mediet. Fysisk, fasen blodplater konvertere fase- eller baneforskjellene til amplitudeforskjeller. Som et resultat av disse amplitudeforskjellene, vises bildet av objektet i mikroskopet ved gjensidig kansellering eller forsterkning av direkte lysstråler som passerer gjennom objektet og blir avledet ved objektet.
• Dermed er en ulempe med dette prinsippet det faktum at ideelle fase-preparater ikke er regelen, siden amplitudeeffekter vanligvis er lagt på faseeffektene.
• Basert på prinsippet om avbildning av strukturene ved amplitudeforskjeller, blir de eksisterende cellestrukturene representert som graderte gråtoner avhengig av deres egen optiske tetthet. For å forbedre reproduksjonen av strukturene, bruk av tynne preparater og fase blodplater avhengig av arten av de forskjellige fasene blodplater, både positive og negative fasekontraster kan oppnås, noe som resulterer i at objektene av interesse vises enten mørkere eller lysere enn omgivelsene.
• I fasekontrastmikroskopi er det videre viktig å merke seg det nekrose (celledød) kan oppstå relativt raskt på grunn av eksponering for lys og ytterligere skade på vitale celler. Som et resultat av denne raske nekrose utvikling, må vurderingen av lysbildene utføres innen en til to timer for å opprettholde gyldighet av det diagnostiske tiltaket. Dermed krever denne tidsbegrensningen på evaluering av vitale prøver vanligvis dokumentasjon ved fotomikrografi eller, om nødvendig, ved å utføre mikrokinematografi. Et mikrofotografi er et fotografi av et mikroskopisk bilde tatt med et kamera festet til et mikroskop. Gjennom mikrokinematografi er det muligheten til å fange gjenstander under mikroskopisk observasjon i bevegelige bilder.