Fluorescens in situ hybridisering (FISH) er en genetisk screeningmetode for påvisning av DNA (deoksyribonukleinsyre) i kjerner av individuelle celler.
Denne metoden innebærer bruk av spesifikke DNA-prober som bare kan gi informasjon om genomiske regioner som sonden som brukes er spesifikk.
Indikasjoner (bruksområder)
- Mistanke om numerisk kromosomavvik:
- Påvisning av numeriske kromosomavvik (f.eks. Trisomi 21).
- For kvantifisering av mosaikker for kromosomavvik (f.eks. I Ullrich-Turnersyndrom).
- Påvisning for mikrodeleksjoner (f.eks. Monosomi 22q11.2).
- Påvisning av kromosomavvik (f.eks. kronisk lymfocytisk leukemi (CLL), ikke-Hodgkin lymfom).
Ovennevnte indikasjoner er analysert ved mellomfase FISH (se “The Laboratory Procedure” for detaljer).
Fremgangsmåten
Materiale som kreves
- Heparinblod (minimum 1-2 ml)
Klargjøring av pasienten
- Ikke nødvendig
Forstyrrende faktorer
- Ingen kjent
Laboratoriemetoden
Fluorescens in situ hybridisering (FISH) innebærer bruk av fluorescerende merkede DNA-prober (FISH-prober). Disse kan binde seg til et bestemt DNA-sted på et kromosom, som kalles hybridisering. Etter eller etter binding av den fluorescerende merkede sonden, kan evaluering utføres ved hjelp av et mikroskop. I denne prosessen bestemmes antall fluorescenssignaler i mellomfasekjerner. Videre en vurdering av plasseringen (f.eks. Translokasjon / flytting av plassering / til et annet kromosom) ved metafase kromosomer er mulig.
Når forskjellige fluorescerende fargestoffer brukes til forskjellige mål-DNA i FISH-prosedyren, blir det referert til som flerfarget FISK. Dette tillater fullstendig visualisering av genomet.
I noen tilfeller er DNA-sonden ikke merket direkte med et fluorescerende fargestoff, som kalles en indirekte prosedyre. I stedet er det merket med stoffer som biotin eller digoksigenin. Denne metoden anses som mer komplisert, men er mer følsom.
